由于高速公路比普通道路有一定的区别，所以行驶高速公路的车辆、司机和乘客，要遵守一些附加的交通规则。这些基本上是：
超车（在香港也称为爬头）：只应该按照法律的规定超车（在实行左侧通行的国家只能右侧超车，在实行右侧通行的国家只能左侧超车）。但是，在一些地方，允许在塞车中右行（或左行）“通过”，而非超车。
行驶：只可以在主线车道道（和在必要时间，在超车道）行驶。路肩、匝道与紧急停车湾里不能行驶。但是，基于交通纾解的需要，台湾的高速公路会开放固定时段以及特定路段得路肩供驾驶人使用，以暂时解决道路容量不足的问题。
停车：不准在超车道和行车道上停车，只准在车辆故障或其他意外时在路边（在应急车道里面）停车，停车之后应当放置应急标志，以便警告其他车辆注意安全。
车速：不足最低限速者，以及超速者（所谓“飙车”），都是违法行为，尤其对于超速，会有比较昂贵的罚金，甚至于会扣留或者吊销驾驶执照。
世界上其他国家与地区的一些相关规定：
台湾：基于许多安全顾虑，高速公路不开放重型摩托车行驶，但担任国宾车队护卫及开导任务之宪警、执行紧急勤务之公路警察或执行高速公路隧道紧急任务之摩托车，不受此限制。
中国大陆：以前新司机在第一次领到驾驶执照之后的第一年不准开车上高速公路，同时新司机在这一年内要在车尾部贴上统一核发的“实习”标志，以确定是否是新司机。这个规定在《中华人民共和国道路交通安全法》最后审议表决通过之前被法律人士删除。
瑞士：已在即将驶出高速的匝道车辆，可以右侧“通过”车辆。此外，万一在上路时遇到无法正常驶入行车道的事况，可在停车带短距离行车，但必须在最早的时间进入行车道。
美国：美国各州有关高速公路的法规都不尽相同，但大多数州都有规定多轴车，如大货车和连接车，应驶于外线。另外，大多数驾驶者都有“位在越内线的车辆应该开越快”的默契。
